总RNA提取试剂盒提供了一种快速,简单,经济有效的方法,可从全血,哺乳动物细胞,细菌细胞和真菌细胞中分离总RNA。优化的洗涤剂和离液盐用于裂解细胞并灭活核糖核酸酶。专门的高盐缓冲系统允许RNA物质基团结合到旋转柱的玻璃纤维基质上,同时使污染物通过柱被有效地洗去。纯的RNA用RE缓冲液洗脱,不用酚提取或醇沉淀。
总RNA提取试剂盒使用注意事项如下:
1、如果需要测量RNA的A260/A280的比值,建议使用RNA定量缓冲液对样品稀释后,进行测量。
2、所有离心管,枪头及相关溶液都必须无RNA酶污染。耐高温器物可180°C烘烤4小时以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%DEPC至重蒸水或MiliQ级水中,处理过夜,灭菌即成DEPC水。
3、使用冻存的细胞或组织抽提总RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽RNA,推荐先加入适量Trizol,并裂解样品后冻存。
4、必须戴一次性手套操作,且尽量不要对着RNA样品呼气或说话,以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。
5、Trizol含有毒物质苯酚,避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触Trizol,请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。