类胡萝卜素(carotenoid)含量试剂盒说明书
微量法100管/96样
注 意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
类胡萝卜素是一种脂溶性且具有营养特性的化合物,给植物和动物提供天然色素,是重要的抗氧化剂,并有能力转换为必需维生素。类胡萝卜素可预防细胞,组织和基因损毁,增强身体免疫系统,抵御感染,减少癌症风险,保护心脏。
测定原理:
样品通过混合有机溶剂萃取,类胡萝卜素与非类胡萝卜素成分分离,在440nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、烘箱,100目筛、三角瓶或烧杯、漏斗,纱布、玻璃试管、可见分光光度计/酶标仪。
试剂组成和配制:
试剂一:液体100mL×20瓶,4℃保存。
试剂二:液体100mL×10瓶。4℃保存。
提取液:临用前可按照试剂一(V):试剂二(V)= 2:1混匀,封口膜封紧,防止挥发,配置好的提取液4℃保存。
样本处理:
组织样品:60℃烘干粉碎,过100目筛,称约0.01g,加2mL提取液,37℃振荡提取60min。
测定操作表:
空白管 | 测定管 | |
样本(μL) | 1000 | |
提取液(μL) | 1000 | |
迅速测定440nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管 |
注意:空白管只需测定一次。
计算公式:
类胡萝卜素含量(μg/g)= △A×V样总÷(ε×d)÷W×1000
= 1.6×△A÷W
V样总:提取液总体积,2mL;ε:类胡萝卜素经验吸光系数,2500;d:光径,0.5cm; W:样本质量,g
注意事项:
1. 提取液易挥发,有毒性,操作时做好防护措施。
2. 测定必须能迅速,防止挥发造成误差。
电话
微信扫一扫