土壤有效硫试剂盒说明书
微量法100T/96S
注 意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
土壤硫对农林畜牧具有重要作用,环境中许多污染物都是含硫化合物,通过大气传输沉降到土壤中,对生态系统产生一定的影响,土壤中的硫可被植物吸收利用。
测定原理:
利用硫酸钡比浊法测定。
自备实验用品及仪器:
天平、常温离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪。
试剂组成和配制:
酸性土壤提取液:液体105mL×1瓶,4℃保存。
碱性土壤提取液:液体105mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体0.5mL×1支,4℃保存。
试剂二:液体4mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体8mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体4mL×1瓶,4℃保存。
样本处理:
新鲜土样风干,过20目筛,按照土壤质量(g):提取液体积(mL)为1:5的比例(建议称取约0.2g土样,加入1mL提取液),振荡提取1h,10000g ,25℃离心10min,取上清液待测。
测定操作表:
空白管 | 测定管 | |
样本(μL) | 40 | |
提取液(μL) | 40 | |
试剂一(μL) | 5 | 5 |
90℃开盖消煮5min,取出自然冷却 | ||
试剂二(μL) | 40 | 40 |
试剂三(μL) | 80 | 80 |
试剂四(μL) | 40 | 40 |
充分混匀,25℃震荡20min | ||
于微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定440nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管 |
计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.0104x + 0.0009,R2 = 0.9999
有效硫含量(mg/kg)=(△A-0.0009)÷ 0.0104÷(W÷V样总)
= 96.15×(△A-0.0009)÷W
V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.0052x + 0.0009,R2 = 0.9999
有效硫含量(mg/kg)=(△A-0.0009)÷ 0.0052÷(W÷V样总)
=192.3×(△A-0.0009)÷W
V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g
注意事项:
1. 酸性和碱性土壤提取液不一样,提取前必须确认土壤的酸碱性,加入对应的提取液。
2. 90℃消煮必须开盖,使试剂一wan全散出。
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