植物全钙含量试剂盒说明书
测定意义:
钙是植物结构组成元素,主要构成果胶酸钙、钙调素蛋白、肌醇六磷酸钙镁等,在液泡中有大量的有机酸钙,如草酸钙、柠檬酸钙、苹果酸钙等。钙能稳定细胞膜、细胞壁,还参与第二信使传递,调节渗透作用,具有酶促作用等。
测定原理:
浓硫酸高温消解植物样品,采用火焰光度计测定样品中的钙含量。
自备实验用品及仪器:
消解仪、消化管、天平、烘箱、100目筛、移液管、浓硫酸、火焰光度计。
试剂组成和配制:
标准品:液体20mL×1瓶,4℃保存。浓度为1mmol/L母液。
样本处理:
新鲜植物样本风干或50℃烘干,过100目筛,称0.5g左右置于消化管中,加1mL蒸馏水润湿样品,再加10mL浓硫酸,轻轻摇匀,同时做两个样品空白管,置于消解仪上,消解参数设置为:100℃,10min;200℃,10min;350℃,20min;400℃,30min。消解结束后用蒸馏水定容至100mL待测(也可取1ml样品加9ml蒸馏水稀释十倍)。
测定操作:
1.标准曲线绘制
标准品(mL) | 0 | 0.08 | 0.4 | 2 | 10 |
蒸馏水(mL) | 10 | 9.92 | 9.6 | 8 | 0 |
标准品浓度(μmol/L) | 0 | 8 | 40 | 200 | 1000 |
2.样品测定
取样品用火焰光度计测定,若浓度为1000μmol/L以上则进行适当稀释。
计算公式:
全钙含量(g/kg 干重)= C×V总×稀释倍数÷W×10-3×40
C:样品浓度;μmol/L;V总:加入提取液体积,100mL= 0.1L,W:样本质量,g
注意事项:
1. 未经特殊处理的样品消解为白色或无色即消解wan全,否则延长消解时间继续消解至消解液发白。
2. 每次开机需做标准曲线。
配方:
标准品:配方
标准品:1mmol/L CaCl2溶液 取100mL试剂瓶,称11.1mg氯化钙溶于100mL蒸馏水
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