小鼠外周血中性粒细胞
产品名称 ：小鼠外周血中性粒细胞
产品货号 ：YLK-XB0851h
组织来源 ：外周血
产品规格 ：5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介：
外周血中性粒细胞分离自外周血。外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首ci提出外周血这一新概念。白细胞是一类无色、球形、有核的血细胞。白细胞不是一个均一的细胞群，根据其形态、功能和来源部位可以分为三大类 ：粒细胞、单核细胞和淋巴细胞，其中粒细胞又可根据胞质中颗粒的染色性质不同，分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞三种。
中性粒细胞是在瑞氏(W right) 染色血涂片中，胞质呈无色或极浅的淡红色，有许多弥散分布的细小的(0. 2～0. 4微米) 浅红或浅紫色的te有颗粒。细胞核呈杆状或2～5分叶状，叶与叶间有细丝相连。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。中性粒细胞来源于骨髓，具有分叶形或杆状的核，胞浆内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒。这些颗粒多是溶酶体，内含髓过氧化酶、溶菌/酶、碱性磷酸酶和酸性水解酶等丰富的酶类，与细胞的吞噬和消化功能有关。
中性粒细胞在血液的非特异性免疫中起着十分重要的作用，它处于机体抵御微生物病原体，特别是在化脓性细菌入侵的第一线，具有很强的吞噬活性，可吞噬细菌、衰老的红细胞、抗原一抗体复合物和坏死的细胞等。中性粒细胞内含有大量溶酶体酶，因此能将吞噬入细胞内的细菌和组织碎片彻di分解。当中性粒细胞吞噬数十个细菌后，自身发生解体，所释出的各种溶酶体酶类能溶解周围组织而形成脓液。中性粒细胞是人体内寿命最短的细胞，一般体外培养12-24h内活性稳定，48h活性下降，96h基本死亡。
质量检测
优利科生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 ：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 ：每2-3天换液一次
生长特性 ：悬浮
细胞形态 ：圆形
传代特性 ：不增殖。不传代
传代比例 ：不传代
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培养条件 ：气相 ：空气，95% 。C O2，5%
该细胞体外培养周期有限。建议使用优利科生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完培终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。
3) 经1000rpm离心5min丢弃上清，用5ml完培基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。
5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰/酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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